白介素-6受體ELISA KIT?，運用雙抗夾心 ELISA 技術，可精準定量血清等樣本中的白介素 - 6 受體，操作便捷，助力科研。

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更新時間：2025-07-04

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白介素-6受體ELISA KIT

白介素-6受體ELISA KIT是科研中用于定量檢測生物樣本里白介素 - 6 受體含量的工具。IL-6R 在免疫調節、炎癥反應進程里作用關鍵，檢測其含量對相關研究意義重大。

檢測原理：試劑盒多采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定法。在酶聯板上預包被針對 IL-6R 的特異性抗體。加入樣本后，樣本中的 IL-6R 與固相抗體特異性結合。接著加入酶標記的抗 IL-6R 抗體，其與已結合在固相抗體上的 IL-6R 形成 “固相抗體 - IL-6R - 酶標抗體" 復合物。經過充分洗滌去除未結合物質，加入底物溶液（如 TMB），在酶的催化下，底物發生顯色反應，顏色深淺與樣本中 IL-6R 的含量成正比。通過酶標儀在特定波長（一般為 450nm）下測量吸光度，與標準曲線對比，計算出樣本中 IL-6R 的濃度。
試劑盒組成

酶聯板：96 孔或 48 孔，已預包被抗 IL-6R 抗體，是反應發生的載體。
標準品：一般為凍干品，有 2 瓶。臨用前需用標準品稀釋液復溶，并稀釋成不同濃度梯度，如 0、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL 等，用于繪制標準曲線。
樣本xi釋液：用于稀釋濃度過高的待測樣本，確保樣本濃度處于試劑盒檢測范圍內。
酶標抗體：即 HRP 標記的抗 IL-6R 抗體，為濃縮液，使用時需按要求用酶標抗體稀釋液稀釋。
酶標抗體xi釋液：專門用于稀釋酶標抗體。
底物溶液：如 TMB 底物，可與酶標抗體中的 HRP 發生反應，產生顏色變化。
洗滌液：通常為濃縮液，使用時需按比例用蒸餾水或去離子水稀釋，用于洗滌酶聯板，去除未結合的物質，降低背景干擾。
終止液：多為強酸溶液（如硫酸），用于終止底物的顯色反應，使反應液顏色穩定，便于讀數。
封板膜：用于在溫育過程中覆蓋酶聯板，防止液體蒸發和外界污染。
使用說明書：詳細介紹試劑盒的使用方法、注意事項、性能指標等。

血清：采集血液后，室溫放置 2 小時或 4℃過夜，隨后以 1000×g 離心 20 分鐘，取上清備用。采血應使用無熱原、無內毒素的一次性器材。
血漿：可用乙二胺四乙酸（EDTA）、肝素等作為抗凝劑。樣本采集后 30 分鐘內，在 2 - 8℃下以 1000×g 離心 15 分鐘，取上清。
細胞培養上清：將細胞培養上清以 1000×g 離心 20 分鐘，去除細胞碎片和雜質后，取上清用于檢測。
組織勻漿：用預冷的磷酸鹽緩沖液（PBS，0.01M，pH = 7.4）沖洗組織，去除殘留血液。剪碎組織后，按照約 1:9（w/v）的比例加入 PBS，在冰上充分研磨。再經 5000×g 離心 5 - 10 分鐘，取上清用于檢測。
樣本采集后若短期內檢測，可保存于 4℃；若需長時間保存，需置于 - 20℃或 - 80℃凍存，且要避免反復凍融，溶血樣本一般不適合用于檢測。

準備工作：從冰箱取出試劑盒，提前 30 分鐘使其平衡至室溫。同時，將濃縮洗滌液按要求比例用蒸餾水或去離子水稀釋備用。
加樣：設置空白孔、標準品孔和樣本孔。空白孔加入樣本xi釋液，標準品孔加入不同濃度的標準品，樣本孔加入處理好的樣本，每孔加樣量通常為 100μL，輕輕混勻，37℃溫育 90 分鐘。
洗滌：溫育結束后，棄去孔內液體，用洗滌液加滿各孔，浸泡 1 - 2 分鐘后甩干，重復洗滌 5 次，確保che底洗凈未結合物質。
加酶標抗體：每孔加入 100μL 稀釋好的酶標抗體工作液，37℃溫育 60 分鐘。
再次洗滌：重復上述洗滌步驟。
顯色：每孔加入 90μL 底物溶液，輕輕混勻，37℃避光顯色 15 - 30 分鐘（需根據實際顯色情況判斷）。
終止反應：每孔加入 50μL 終止液，此時溶液顏色由藍色變為黃色。
讀數：在加終止液后 15 分鐘內，用酶標儀在 450nm 波長處測量各孔的吸光度（OD 值）。
計算結果：以標準品濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，繪制標準曲線。根據樣本的 OD 值從標準曲線中查出對應的濃度，若樣本進行了稀釋，需乘以相應的稀釋倍數，從而得到實際濃度。